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　　大多數(shù)細(xì)胞在msc無(wú)血清培養(yǎng)基中單獨(dú)培養(yǎng)時(shí)都不能增殖，它們需要補(bǔ)充額外的生長(zhǎng)因子和細(xì)胞因子，如激素、轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、微量元素或ECM因子。激素如胰島素、生長(zhǎng)激素等胰島素作為一種多肽激素，對(duì)哺乳動(dòng)物細(xì)胞具有多效合成作用，促進(jìn)葡萄糖和氨基酸攝取、脂肪生成、單價(jià)陽(yáng)離子和磷酸轉(zhuǎn)運(yùn)、蛋白質(zhì)和核酸合成。轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，如轉(zhuǎn)鐵蛋白，轉(zhuǎn)鐵蛋白作為鐵的載體，也有助于降低氧自由基和過(guò)氧化氫的毒性水平。ECM因子是某些貼壁生長(zhǎng)細(xì)胞所必需的組分，如纖連蛋白、膠原蛋白、層粘連蛋白等。

 

　　下面為大家分享一下msc無(wú)血清培養(yǎng)基的使用注意事項(xiàng)：

 

　　1、細(xì)胞培養(yǎng)用水一般為三蒸水(經(jīng)石英蒸餾器蒸餾)或超純水，生產(chǎn)上一般為注射用水。

 

　　2、建議盡量選擇與所用量相匹配的包裝一次使用，因?yàn)榘b一旦打開(kāi)，組分可能會(huì)變質(zhì)或因受潮而結(jié)團(tuán)。

 

　　3、溶解干粉培養(yǎng)基時(shí)先加入終體積90%-95%的培養(yǎng)用水，添加劑加完后再補(bǔ)足。

 

　　4、如需添加的組分較多時(shí)，某一組分*溶解后，再添加另一組分。

 

　　5、待msc無(wú)血清培養(yǎng)基溶解后再加入碳酸氫鈉，以免產(chǎn)生沉淀。

 

　　6、所有成分溶解后，培養(yǎng)基應(yīng)立即過(guò)濾或高壓除菌，以免產(chǎn)生沉淀或有微生物污染。

 

　　7、在過(guò)濾除菌時(shí)，一般情況下應(yīng)調(diào)pH比所需值低0.1～0.2個(gè)單位，因過(guò)濾除菌后，pH值會(huì)升高約0.2。

 

　　8、在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，建議不加或加少量的抗生素，如血清的濃度較低則所加抗生素的量也要相應(yīng)降低一些。

 

　　9、建議用1NHCl或1NNaOH來(lái)調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH，因?yàn)橛锰妓釟溻c來(lái)調(diào)對(duì)培養(yǎng)液的滲透壓影響比較大。